项目介绍
解析电喷雾电离(DESI)质谱成像是一种重要的质谱成像技术,它通过非接触式的方式在常压环境下实现样品表面分子的原位解吸与电离。DESI无需在样品表面涂覆基质,而是利用高速带电溶剂液滴喷射到组织切片表面,通过液滴对目标分子的萃取和电离作用,将代谢物、脂质、药物等分子从样品表面“解析”出来,并直接进入质谱仪进行分析。该技术在常压下操作,样品无需复杂前处理,能够最大程度保持组织的原始形态完整性。
DESI质谱成像以其非破坏性、快速成像和良好的分子覆盖能力,在代谢组学、药物分布研究、法医学和临床病理诊断等领域展现出独特优势。尤其在脂质组学和小分子代谢物的空间分布分析中,DESI能够实现对极性和非极性化合物的同时检测,提供更全面的分子图谱。结合高分辨质谱平台,DESI可实现微米级空间分辨率,能够在不破坏组织结构的前提下,清晰呈现药物及其代谢产物在器官中的分布路径与富集区域,为药物作用机制、疾病生物标志物发现等研究提供关键信息。
送样要求
1. 冷冻切片:术中或切除下来的组织应立即冷冻,防止组织内的生物分子发生降解,保证样品的新鲜度。
2. 样品如果不能直接切片,可以使用包埋剂处理,以维持组织的形态结构。
3. 组织先用干冰或液氮预冷,使组织迅速降温,减少冰晶的形成,降低对组织的损伤。浸在液氮中时,注意不要冻伤组织,操作过程要小心谨慎。
4. 保存在-80℃冰箱,建议干冰运输,确保样品在储存和运输过程中始终处于低温环境,保持其生物活性。
5. 仔细记录切片的方向,便于后续对检测结果进行准确的定位和分析。
6. 组织分析最佳的切片厚度为10~15μm,在这个厚度范围内,能较好地平衡检测灵敏度和组织结构完整性。
7. 不可以使用OCT作为切片包埋剂,因为OCT可能会对质谱成像检测产生干扰,影响实验结果。如有必要,在切片阶段可使用少量OCT固定样品,但要注意控制使用量,尽量减少其对检测的影响。
8. CMC和明胶可用于替代OCT包埋,它们具有良好的生物相容性。
9. 确保使用干净的,未受污染的刀片,避免刀片上的杂质污染样品,影响检测结果的准确性。
质谱成像样品基础原则
1. 平整:保证样品表面平整,有助于后续的质谱成像检测,确保信号的均匀性和准确性。
2. 固定:对样品进行有效固定,防止样品在处理和检测过程中发生形态变化,保持其原有生物特征。
3. 包埋剂:选择合适的包埋剂,避免对样品造成污染,同时保证样品在切片过程中的完整性。
4. 前处理:合理的前处理步骤可以去除杂质,提高样品的检测灵敏度和特异性。
5. 样品排布:科学的样品排布方式能够提高检测效率,便于实验结果的对比和分析。
生物组织样品切片原则
1. 对于所有质谱成像实验来说,新鲜的冰冻组织切片是最理想的选择,能最大程度保留样品的生物分子信息。
2. 不使用福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)的方法处理,因为该方法会使做出的切片在DESI的信号很差,影响检测结果。
3. 组织分析最佳的切片厚度为10~15μm,在此厚度范围内,既能保证检测的灵敏度,又能较好地呈现组织的结构信息。
结果示例
