项目介绍
表面等离子体是一种金属表面的电磁波,由自由振动的光子和电子相互作用产生。表面等离子体共振(surface-plasmon resonance,SPR)是一种发生在两种介质表面的光学现象,这种现象可以由光子或电子诱导。光从光密介质射入光疏介质发生全反射现象,会形成消逝波进入光疏介质。当全反射的消逝波与金属表面的等离子波相遇时,可能会发生共振,反射光能量下降,在反射光能量谱上出现共振峰,这种共振称为表面等离子体共振。引起表面等离子体共振的入射角称为 SPR 角。
SPR 生物传感器提供了一个灵敏的、实时监测分子间相互作用的非标记检测技术。该传感器检测的是 SPR 角的变化,SPR 又与金属表面的折射率相关。当有分析物结合到芯片表面后,导致了芯片表面折射率的改变,从而引起 SPR 角度变化,这就是 SPR 生物传感器实时检测分子间相互作用的基本原理。在相互作用分析时,SPR 角度的改变被实时记录在传感图上。
送样要求
1、大分子样品:蛋白、抗体>0.1 mg;多肽>200 μg,浓度>0.1 mg/mL;小分子样品>1 mg,浓度>1 mg/mL。
2、保存Buffer:尽量不含甘油,咪唑,海藻糖或其他盐类;缓冲液尽量避免Tris等带有氨基基团的试剂。
3、状态:大分子避免颗粒或絮状沉淀,小分子样品粉末或液体,液体可需溶于水或DMSO。
中文文献格式方法描述(参考)
表面等离子体共振(SPR)实验采用配备 CM5 传感器芯片的 Biacore 8K 系统(Cytiva)进行。传感器表面通过以 10 μL/min 的流速注射 420 s 新制备的 1:1 混合液激活,混合液包含 400 mM N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和 100 mM N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。
XXXX 在固定化缓冲液中稀释至 20 μg/mL,以 10 μL/min 的流速固定到样品通道(Fc2)上,通常产生约 12,600 响应单位(RU)的固定化水平。参考通道(Fc1)未经处理。固定化后,通过以 10 μL/min 的流速注射 420 s 的 1 M 乙醇胺盐酸盐(pH 8.5)来封闭表面上的剩余活性酯。对于动力学分析,XXXX 在运行缓冲液(含 0.05%(v/v)Tween-20 的磷酸盐缓冲盐水,PBS-T)中以 7 个不同浓度制备,浓度范围从 0.02 到 1.00 μM。每个浓度以 20 μL/min 的流速依次注射到两个通道(Fc1–Fc2)上,结合相为 60 s,解离相为 90 s。按浓度升序进行 7 个循环,每个循环后再生传感器芯片以恢复基线条件。所有结合数据均使用 Biacore Insight 评估软件(Cytiva)基于 1:1 Langmuir 结合模型进行处理和拟合。
结果示例
